XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG AMLODIPIN TRONG HUYẾT TƯƠNG BẰNG ĐIỆN DI MAO QUẢN

Đặt vấn đề: Amlodipin là thuốc chẹn kênh canxi làm hạ huyết áp được sử dụng phổ biến. Ở Việt Nam chưa có phương pháp định lượng amlodipin trong huyết tương bằng điện di mao quản. Đề tài được thực hiện với hai mục tiêu: Xây dựng phương pháp định lượng amlodipin trong huyết tương bằng điện di mao quản; Thẩm định phương pháp đã xây dựng theo hướng dẫn US-FDA và EMA. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Mẫu huyết tương chứa amlodipin. Sau khi xây dựng phương pháp xử lý mẫu và khảo sát lựa chọn điều kiện điện di, phương pháp được thẩm định theo US – FDA và EMA. Kết quả: Amlodipin và chất

chuẩn nội nifedipin trong mẫu huyết tương được kiềm hóa và chiết lỏng – lỏng bằng ethyl acetat. Điều kiện điện di: Cột mao quản silica (Chiều dài hiệu dụng: 48,5 cm – Chiều dài tổng: 57,5 cm – Đường kính ngoài: 360 μm – Đường kính trong: 75 μm), nhiệt độ cassette: 25 ± 1 oC, điện thế nguồn: +25 kV, cường độ dòng: 300 μA, bước sóng phát hiện: 237 nm, tiêm mẫu: 35 mBar – 7 giây, dung dịch điện ly nền: Đệm borat 50 mM pH 8,6 chứa SDS 20 mM. Phương pháp được thẩm định đạt các yêu cầu theo US – FDA và EMA. Kết luận: Phương pháp có thể làm cơ sở trong các nghiên cứu tương đương sinh học chế phẩm thuốc chứa amlodipin.

Background: Amlodipine, a calcium channel blocker, is commonly prescribed to treat high blood pressure. In Vietnam, there is no method of quantifying amlodipine in plasma by capillary electrophoresis. Therefore, the thesis was carried out with the objective: Developing and validating a method for quantifying amlodipine in human plasma by capillary electrophoresis. Materials and methods: Human plasma samples contain amlodipine. After optimizing the process, the method was validated according to the guidelines for validation of bioanalytical methods of US-FDA and EMA. Results: Amlodipine and nifedipine as internal

standard (IS) were alkalized with sodium hydroxide and extracted from human plasma by liquid - liquid extraction technique with ethyl acetate. Electrophoresis conditions: Fused-silica capillary column (effective column length: 48.5 cm, total column length 57.5 cm, outside diameter: 75 μm, internal diameter: 75 μm), background electrolyte: 50 mM borate buffer at pH 8.6 containing 20 mM sodium dodecyl sulfate, voltage: +25 kV, current: 300 μA, column temperature: 25 ± 1 oC, sample injection: 35 mBar - 7s, detection at 237 nm. The method was validated and met US-FDA and EMA requirements. Conclusion: The method can serve as a basis in bioequivalence studies of medicinal products containing amlodipine.