CHẨN ĐOÁN VIRUS HỢP BÀO ĐƯỜNG HÔ HẤP GÂY NHIỄM TRÙNG HÔ HẤP DƯỚI BẰNG KỸ THUẬT RT-PCR TỔ

Mục tiêu: Phát triển và áp dụng quy trình kỹ thuật RT-PCR tổ để chẩn đoán virus RSV gây nhiễm trùng hô hấp ở bệnh nhân nhi. Phương pháp và đối tượng nghiên cứu: Xây dựng và hiệu chỉnh quy trình kỹ thuật RT-PCR tổ nested RT-PCR) để khuếch đại vùng gen F của genome RSV, thực hiện thực nghiệm với các mẫu chứng và áp dụng để chẩn đoán với các bệnh phẩm lâm sàng. Kết quả nghiên cứu: Kết quả thực hiện với các mẫu chứng cho thấy kỹ thuật khuếch đại đặc hiệu RNA của virus RSV mà không khuếch đại các genome của các tác nhân virus và vi khuẩn gây nhiễm trùng hô hấp thường gặp, ngưỡng xác định của quy trình là 102 bản sao. Áp dụng chẩn đoán trên 109 mẫu bệnh phẩm ngoáy họng của bệnh nhi nhiễm trùng hô hấp cho kết quả 27 (tỷ lệ 24,8%) bệnh nhi nhiễm trùng với RSV, trong đó viêm phế quản có 6/30 (20%), viêm tiểu phế quản có 7/26(27%) và viêm phổi là 14/53 (26,4%). Kết luận Kỹ thuật RT-PCR tổ này là một phương pháp chẩn đoán hửu ích và tin cậy để chẩn đoán nhiễm trùng do virus RSV ở đường hô hấp.

Objective: To develop and apply a nested reverse transcription- polymerase chain reaction (nested RT-PCR) for detection of RSV in lower acute respiratory infections. Materials and methods: A nested reverse transcription- polymerase chain reaction was used to amplify a sequence of the F gene in the RSV genomic RNA, optimized and compared the sensitivity and specificity of this assay with the control samples and then applied this procedure for diagnosing RSV from clinical samples. Results: This nested RT-PCR assay amplified the specific target fragment of RSV RNA and did not amplify any sequence of genomes of the tested common viruses and bacteria causing respiratory infections. The minimal level of detection of this procedure was 102 copies/ml. Results for detection of RSV on 109 samples of throat swabs or nasopharyngeal swabs from children with lower respiratory infections showed that twenty seven patients were positive with RSV 24.8%), among which six out of 30 (20%) were with bronchitis, seven out of 26 27%) were with bronchiolitis and fourteen out of 53 (26.4%) were with pneumonia. Conclusion: This nested RT-PCR was found to be useful and reliable for detection of RSV in respiratory infections.